1几何参数的测量
在进行测量前,需针对不同的物镜进行系统标尺的标定。尺寸标定用于确定每一个像素所表示的实际物理尺寸,单位为μm/像素、mm/像素、cm/像素、in/像素等,可根据需要选择。标定应沿水平和垂直两个方向进行。如果选用十字测微尺,水平、垂直两个方向的标定可一次完成。具体操作方法:将测微尺沿水平方向放入视场,冻结图像,点击标尺标定按钮,系统会弹出标定对话框及滑动标尺,在X标尺尺寸及Y标尺尺寸编辑框中输入实际标尺尺寸,调整滑动标尺,使其与测微尺刻度相重合,按确认键,便完成标定。如果采用非十字测微尺,标定要分两步完成,先沿水平方向标定,再沿垂直方向标定,操作方法如前所述。标定结果可存盘,备以后使用。可根据实际使用的测微尺在标尺单位下拉列表中选取标尺单位。标尺标定好后,测量前应先调用相应物镜的标尺设定为系统标尺。然后对目标进行相应的线测定、圆测量、角度测量等[11-14],如图2所示。
2选取目标进行分析
MIAS-1系统为目标选取工作提供两种方法:利用图像的光密度或颜色来选取。在实际应用中,对植物病原微生物目标的选取可以通过颜色来选取。分析目标选定后可对选取的部分进行一定的处理,比如圆滑边界、消除毛刺等操作,不过要根据实际情况进行操作,以不失去标本的原始形态为准则。目标选定后,可进行目标分析。和大多数图像处理软件一样,本系统软件提供了方便快捷的目标分析操作。图3是进行自动切分分析后得到的结果。结果中包含了分析区域的长轴/短轴长度、面积大小等几何参数,还包括了其他如光密度参数、形态学参数等多种参数。
3结束语
随着科学技术进步,数码显微摄影技术及计算机图像处理系统在工业、医学、农学等多个领域都得到了广泛的应用。掌握一定的数码显微摄影技术,获得清晰的病原菌图片并进行相应的分析,是植物病理学实验教学中非常重要的一环。现在数码互动显微系统在实验教学中也得到了广泛的应用,这不仅可以丰富实验课的教学内容,提高教学效率,而且使学生看到的标本更直观,较传统的挂图、图谱、幻灯等辅助教学手段具有不可替代的优点[15]。
不同型号的显微照相系统,操作界面虽然不同,但显微镜的操作方法,需要获得的目标分析数据是一样的。近年来,随着显微镜技术和计算机技术的飞速发展,高分辨率、超大景深、自动化程度更高的数码显微照相系统及相应的图像应用软件不断更新,但价格一般偏高,动辄几十万元,不利于广泛的普及应用。类似本文所提到的数码显微摄像系统,价格适中,能够满足教学中对图像及数据处理的要求,目前在植物病原微生物的实验教学中普遍应用,应充分利用现有设备的功能,熟悉操作方法,以提高教学质量。声明:本文所提到的显微镜型号及软件系统,仅当做探讨显微摄像技术应用的实例,不用做产品推广和其他商业用途。
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